医药学论文:人脐静脉内皮细胞分离培养的改进及其鉴定
【摘要】 目的 改进静脉内皮细胞原代培养的方法,提高体外培养血管内皮细胞的成功率。方法 采用5号带柄一次性静脉输液针灌注消化液,分别用0.125%、0.25%胰蛋白酶和0.1%胶原酶消化脐静脉内膜,比较三种酶液消化的结果,并在倒置相差显微镜下观察其形态特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。结果 0.125%、0.25%胰蛋白酶和0.1%胶原酶的最佳消化时间分别为15min,10min,12min。倒置相差显微镜下观察内皮细胞为单层生长,鹅卵石样镶嵌排列。免疫组织化学检测表明细胞内有Ⅷ因子相关抗原。结论 胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液,且0.1%胶原酶消化12min获得的细胞数量多,成活率高。
【关键词】 人脐静脉 内皮细胞 细胞培养 分离 改进
Improvement of separation ,culture and identification of human
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