医药学论文：树突状细胞和VEGF在膀胱癌中的表达及其意义

【摘要】 目的 探讨人类膀胱癌组织中树突状细胞(dendritic cell，DC)、血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其意义。方法 应用免疫组化（S-P）法，检测45例人类膀胱癌组织中DC和VEGF的表达情况。结果 膀胱癌的临床分期和病理分级与DC的浸润程度呈负相关（P< 0.05）；与VEGF的表达呈正相关（P＜0.05）。DC在癌组织中的表达与VEGF呈负相关（P＜0.01）。 结论 DC和VEGF的表达可以作为判断膀胱癌恶性程度和预后的参考指标，VEGF可以抑制DC在肿瘤组织中的浸润，从而导致肿瘤细胞逃脱机体的免疫监视。
【关键词】 膀胱肿瘤；树突状细胞；血管内皮生长因子
【Abstract】 Objective To study the expression and significance of dendritic cells and vascular endothelial growth factor (VEGF) in human bladder cancer.Methods The expressions of S-100+DC and VEGF in 45 cases of bladder cancer were detected by immunohistochemistry using streptavidin/peroxidase(SP).Results The clinical stage and histological grade of bladder cancer was inversely correlated with the number of S-100+DC（P＜0.05）；but positively correlated with the expression of VEGF（P＜0.05）； The expression of VEGF was significantly lower in samples with highly infiltrating S-100+DC（P＜0.01）.Conclusion The expression of DC and VEGF could be viewed as a valuable index in judging the malignant degree and prognosis of bladder cancer， VEGF could inhibit the infiltration of DC in bladder cancer.
【Key words】 bladder neoplasms； DC； VEGF
VEGF可以由肿瘤细胞释放，在肿瘤血管生成过程中发挥着关键作用，近来有研究表明，VEGF可以抑制DC的抗原呈递功能，影响DC的成熟。DC是目前所知的机体内功能最为强大的抗原呈递细胞，在机体抗肿瘤免疫中起着重要作用。但目前国内外很少将研究集中在临床环境下VEGF对DC的抑制作用，笔者利用免疫组化的方法检测了45例人类膀胱癌组织中DC和VEGF的表达情况，并分析其临床意义。
1 材料与方法
1.1 标本来源 选择解放军第252医院泌尿外科1996～2004年有随访和完整资料的膀胱癌患者的手术标本45例，其中男34例，女11例，男：女＝3：1，年龄35～78岁，平均56.2岁。术前未经过任何特殊治疗，术后病理证实均为原发性膀胱移行细胞癌。病理学分级按1978年WHO分级标准：G1 10例，G2 20例，G3 15例。临床分期按世界抗癌联盟（UICC）标准：Tis～T1 28例，T2～T4 17例。
1.2 主要试剂 S-100蛋白兔抗人多克隆抗体(1：200)购于丹麦DAKO公司，VEGF兔抗人多克隆抗体(1：100)购于美国Santa Cruz公司，S-P超敏试剂盒购于福州迈新生物技术开发有限公司。
1.3 免疫组化染色 有标本均经10%的中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，取3μm切片，分别加入抗S-100蛋白、抗VEGF，4℃过夜。用S-P染色法显色，操作严格按照产品说明书进行。用滴加PBS液代替一抗作阴性对照。
1.4 结果判断 2名病理科医师在不了解临床情况下独立观察，每张切片选取5个最具代表性的高倍视野。S-100蛋白阳性细胞以胞浆、胞核棕色染色为准，分别计数5个高倍视野（400×）内阳性细胞数目并以其平均值作为阳性细胞密度。VEGF染色阳性标准为细胞浆染色呈暗褐色或浅褐色，且着色细胞数大于25％。
1.5 统计学方法 SPSS10.0软件进行统计学处理，采用卡方检验、独立样本t检验、F检验及Q检验。
2 结果
2.1 S-100＋DC、VEGF的表达与膀胱癌临床分期、病理分级的关系 高倍光镜下，S-100＋DC的胞浆和胞核均染成棕色，细胞轮廓呈不规则状，其表面可见数目不等、长短不一的树突状突起，胞核亦成不规则形，S-100＋DC在癌组织中的浸润密度随着肿瘤临床分期和病理分级的升高而降低，差异有显著性（P＜0.05，见图1）。VEGF着色颗粒主要在癌细胞胞浆及胞膜上，部分癌细胞周围血管内皮细胞呈弱阳性表达，强阳性表达呈暗褐色，弱阳性表达呈浅褐色，VEGF在癌组织中的表达与肿瘤临床分期和病理分级呈正相关（P＜0.05，见表1，图2、3）。
2.2 VEGF表达与S-100＋DC密度的关系 膀胱癌组织中VEGF阳性表达组的S-100＋DC浸润密度均值显著低于VEGF阴性表达组（P< 0.01，见表2）。