医药学论文：超声法提取莪术中牻牛儿酮和姜黄素最佳工艺研究

超声法提取莪术中牻牛儿酮和姜黄素最佳工艺研究

　　钟华1，尹蓉莉1，姜建辉2，田仁君2，梁雪兰2，陈金玉1,袁龙1,陈静1

　　1 成都中医药大学药学院，四川成都（610075）

　　2 四川中医药高等专科学校，四川绵阳（621000）

　　摘 要:目的 探讨超声法提取莪术中指标性成分的最佳工艺条件。方法 以HPLC 法为测定方法,牻牛儿酮和姜黄素为考察指标,采用正交试验法优化提取工艺。结果 超声法提取莪术其提取浓度以及提取次数对提取效果有显著影响，其次为溶剂用量，提取时间影响不大。结论 以60%的乙醇，8 倍量的提取溶剂，超声提取 2 次，每次30min 即可达到较好的效果。

　　关键词:超声法；牻牛儿酮；姜黄素；正交设计；HPLC

　　莪术作为传统中药具有活血化瘀的功效, 现代研究表明，其活性成分莪术醇、莪术酮、牻牛儿酮、β-榄香烯、姜黄素(Ⅰ) 、脱甲氧基姜黄素(Ⅱ) 和双脱甲氧基姜黄素(Ⅲ)等在抗病毒、抗肿瘤方面的确切疗效和作用,为其带来了广阔的扩展空间和市场，不仅能直接抑制、破坏肿瘤细胞和灭活病原体,而且还可以增强机体自身的免疫功能,从而促进机体对肿瘤和病毒的免疫反应。现目前莪术挥发油的提取方法主要有超临界流体萃取法和水蒸汽蒸馏法，从实际现有条件出发，以及考虑大生产的需要，本实验主要研究超声场强化分离提取法，超声波在中药的提取中已显示出了明显的优势，具有提取效率高、省工、省时、节能等优点，使得中药提取既符合传统的中医药理论，又能达到提高有效成分的收率和纯度的目的，考察影响提取效果的主要因素包括乙醇浓度、提取时间、溶剂用量、提取次数等作为考察因素,探讨用超声法提取莪术指标性成分的最佳工艺条件,为生产实践中应用提供参考。[1-2]

　　1. 仪器、试药与色谱条件

　　1.1 仪器、试药LC-10ATVAP 型高效液相色谱仪，Prostar 325 型二极管阵列检测器　〗牛儿酮对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号111665-2000401）；姜黄素对照品购自Sigma 公司，乙腈为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯。DL-720D 数控超声仪（超声频率为25kHz）1.2 色谱条件系统Ⅰ色谱柱HypersilCN(250mm×4.6 mm,5um)，流动相：乙腈-水（40：60），柱温35 ℃，体积流量：1.0ml／min，检测波长：210 mm，进样量20μL。[3-5]

　　系统ⅡSymmetry C18 (250mm×4.6 mm,5um)，柱温25 ℃，流动相：乙腈-4%冰醋酸（48：52），体积流量：1.0ml／min，检测波长：430mm，进样量20μL。[6]

　　2. 方法与结果

　　2.1 因素-水平的确立以莪术中牻牛儿酮和姜黄素为考查指标，对工艺中乙醇浓度、提取时间、提取次数、溶剂用量四项为考察因素，各取3 个水平，表头设计见表1。

　　2.2 正交设计表的选择与统计分析采用L9(34)正交表设计试验，筛选最佳工艺条件。正交设计表及统计分析见表2，及表3。

　　由上表可知,各因素影响大小顺序为:A>D>C>B,其中醇提浓度(A)以及提取次数（D）有显著影响，极差分析可知最佳方案为A3B2C2D３，即60%的乙醇，超声提取30min,加8倍量的提取溶剂，超声提取3次。