摘要： 目的用分光光度法对雪灵芝提取物总黄酮含量进行了测定,探讨雪灵芝有效部位对小鼠疼痛的镇痛作用。方法采用Na(NO2)2-AlCl3法测定雪灵芝有效部位总黄酮含量；用热板法、醋酸致痛法观察药物对致痛小鼠反应的影响。结果C012部位总黄酮含量为59.16%，C013部位总黄酮含量为56.86%；C012和C013两部位对热板法致痛具有较好的镇痛作用，C012部位200 mg/kg剂量镇痛效果显著，其0.5 h和2.0 h P< 0.001，4.0 h P< 0.01，1.0 h P< 0.05；100 mg/kg在0.5 h有很好的镇痛效果（P< 0.01）；C013部位200 mg/kg在2.0,4.0 h镇痛效果好（P分别为0.001和0.01），在0.5 h P< 0.05；剂量100 mg/kg在4.0 h具有较好的镇痛效果（P< 0.05）。C012部位对醋酸致痛在100 mg/kg剂量时具有很好的镇痛效果（P< 0.01），50 mg /kg具有较好的镇痛作用（P< 0.05）。结论雪灵芝C012和C013两部位总黄酮含量较高，具有显著的镇痛作用，其作用机制有外周和中枢参与。
关键词： 雪灵芝； 镇痛； 机制
彭宝珠等［1～3］对雪灵芝的药理药效学进行了研究。试验证明，雪灵芝提取物有抗炎、抗免疫、解热镇痛、镇咳祛痰、抗乌头碱引起的心律失常作用、抗缺氧和降血压作用,对酒精性肝损伤具有明显的保护作用，并能够增强免疫功能，对肿瘤具有抑制作用。雪灵芝是一种能提高综合免疫能力的传统药物，其药用价值有进一步研究的必要。
1 材料
1.2 动物昆明种小鼠，雌雄不论，体质量18～22 g，洁净级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：2005A033号。
2.1 分光光度法测定总黄酮含量［5］雪灵芝药材采自西藏自治区，经广西植物研究所高级工程师黄定中鉴定为雪灵芝Arenaria kansuensis Maxim。雪灵芝全草用水提取，水提液上D101大孔树脂，以蒸馏水洗脱至无色；以30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得C012；60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得C013。
分别精密称取样品C012：0.300 5 g，样品C013：0.300 9 g，用60%乙醇溶解并定容到50 ml的容量瓶中，再各取两样品溶液2 ml于50 ml的容量瓶中，定容。参照上述方法，吸取标准品溶液或样品溶液，进行精密度、稳定性、重现性和回收率实验［6］。
2.2.1 热板法
2.2.2 对醋酸引起的小鼠扭体镇痛实验取昆明种小鼠80只，随机分成8组，即生理盐水组，阿司匹林组（200 mg/kg），C012高、中、低剂量组（200，100，50 mg/kg），C013高、中、低剂量组（200，100，50 mg/kg），每组10只。连续灌胃给药7 d，2次/d，每次0.2 ml/10g。最后一次灌胃后1 h，给各组小鼠腹腔注射0.5%乙酸溶液0.2 ml/只。然后以腹部内陷、四肢伸展及臀部抬高为疼痛反应指标，观察15 min内出现扭体反应的次数，计算镇痛率。
3 结果
3.2 稳定性准确吸取标准品溶液1 ml置丁10 ml容量瓶中，按照标准曲线项下操作，测定10，20，30，40，50 min时吸光度，求得RSD为1.58%，稳定性良好。
3.4 加入回收率实验量取样品溶液3份，加入不同量的芦丁对照品溶液，按实验方法进行显色，测定吸光度，计算回收率，回收率在96%～101%之间。
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