医药学论文：研究淡竹叶清热作用有效部位及化学成分

淡竹叶的有效成分物质基础研究一直较为薄弱，现有化学成分的研究显示淡竹叶主含黄酮、三萜类、多糖、酚性成分、氨基酸、有机酸及多种微量元素等［4～6］。依据现代医学理论，结合淡竹叶的中医临床功效，本实验对淡竹叶不同溶剂的提取部位进行了抑菌活性的研究，对淡竹叶清热有效物质基础进行初步筛选，并运用液质联用分析手段对所筛选的部位进行化学成分分析，为淡竹叶的进一步开发利用和质量标准的制定提供科学依据。
1.1 仪器手提式压力蒸气灭菌器（上海华线医用核子仪器有限公司）；移液枪（北京金花移液器厂）；HPLC－MS/MS液质联用仪（Water''s公司，型号Quattro Primer，产地：美国）。
大肠杆菌 CMCC(B) 44103；金葡菌CMCC(B)26003；乙链菌CMCC（B）32210；绿脓菌CMCC(B)24430。
2 方法与结果
2.1.1 提取部位制备
2.1.2 不同提取部位抑菌实验取上述供试品各1 g，加入蒸馏水1 ml，超声溶解。在超净工作台上将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中，待冷却凝固后，用无菌移液管吸取1∶1 000稀释的大肠、金葡、绿脓菌液加到平皿上，用刮铲将菌液涂匀，再用打孔器在培养基上打孔，打孔后每个孔内注入25 μl药液，37℃培养24 h，观察实验结果。结果见表1。表1 淡竹叶不同提取部位抑菌实验结果（略）
从药敏实验中发现，淡竹叶的石油醚、二氯甲烷及水提取部位对该3种细菌抑菌效果为阴性，甲醇提取部位对该3种细菌抑菌效果为阳性，故对甲醇提取部位的抑菌效果做进一步的实验。
2.2.1 对金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑菌实验将甲醇提取部位的浸膏配成相当于生药浓度为40，20，10，5，2.5，1.25，0.625 g·ml-1。同"2.1"项下方法实验，制作培养基，将菌液涂匀于培养基上，打孔，分别注入20 μl的药液，37℃培养，24 h后观察抑菌结果。结果见表2。表2 不同浓度甲醇提取部位对3菌种抑菌圈直径平均值（略）
从表2中我们可以看出淡竹叶甲醇提取部位对金葡菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有一定的抑菌效果，抑菌效果依次为：绿脓杆菌>金葡菌>大肠杆菌，但都属于低敏的范围。
结果显示，5 g·ml-1以下均有乙链球菌生长，故淡竹叶甲醇提取部位对乙链的抑菌最小浓度为10 g·L-1。
2.3.1 供试品制备取浙江产淡竹叶20 g，氯仿回流提取脂溶性物质至无色，药渣再用甲醇回流提取至无色，溶液蒸干热水溶解，离心，上清液过大孔树脂，弃去水液与20％乙醇液，收集75％乙醇溶液，减压回收溶剂至干，甲醇定容于5 ml容量瓶中，作为供试品溶液。