摘要： 目的 探讨结缔组织生长因子（CTGF）在病理性瘢痕形成中的作用。方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测10例瘢痕疙瘩（瘢痕疙瘩组）和10例增生性瘢痕（增生性瘢痕组）中的CTGF mRNA的表达，并以8例正常皮肤（正常皮肤组）作为对照。结果 病理性瘢痕中CTGF mRNA表达均明显高于正常皮肤组（P< 0.05），而瘢痕疙瘩组又高于增生瘢痕组（P< 0.05）。结论 CTGF在病理性瘢痕的形成过程中起到重要作用。
关键词： 瘢痕疙瘩；增生性瘢痕；结缔组织生长因子
1 材料和方法
实验标本均来源于徐州医学院附属医院整形外科，所有标本选取前均未进行过任何放疗、药物注射、外用药物治疗。患者均无系统性疾病，瘢痕表面无破溃、感染。分组：①瘢痕疙瘩组10例，年龄8～42岁，平均20.4岁。病变部位包括胸前、上臂、耳垂、上背部。②增生性瘢痕组10例，年龄3～36岁，平均18.2岁。病变部位包括前胸、下腹、颈部、四肢。③正常皮肤组8例，年龄6～50岁，平均23.5岁。为其他整形手术切除的正常皮肤标本。
切取标本时均在无菌条件下进行，去除皮下脂肪组织及表皮，放入事先标记好序号的冻融管，立即投入液氮速冻，然后转移至－70℃冰箱保存备用。
TRNzol试剂（北京天根公司）；RNA PCR试剂盒（杭州博日科技有限公司）；电动匀浆器 (美国 Homogehizer公司);Eppendorf-5840R台式冷冻离心机（德国Eppendorf公司）；PCR扩增仪PTC-100(美国MJResearch公司)；电脑三恒多用电泳仪（北京六一仪器厂）；凝胶成像系统INGENIUS (美国基因有限公司)。
1.4.1 引物准备
1.4.2 组织总RNA提取
1.4.3 逆转录（RT）
1.4.4 PCR扩增
1.4.5 结果分析
1.5 统计学处理
2 结 果
3组PCR扩增产物经电泳分离并在紫外灯下观察，可见到位于781 bp和475 bp处各有1条特异性条带，与预期扩增片段长度相符。电泳结果见图1。
瘢痕疙瘩组与增生性瘢痕组CTGF mRNA表达量均明显高于正常皮肤组(P＜0.05），而瘢痕疙瘩组表达量又高于增生性瘢痕组（P＜0.05）。见表1。表1 3组间CTGF mRNA表达量的比较（略）
CTGF是1991年Bradham等［3］用亲和色谱法在人体脐静脉内皮细胞的条件培养基中发现的，是一种富含半胱氨酸的多肽。在其他种属的动物如猪、牛、蛙等体内亦存在，在人体多种组织器官如心、肝、肾、动脉和脑中广泛存在。内皮细胞、软骨细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞及某些肿瘤细胞均可表达CTGF［4］。根据靶细胞的不同，CTGF可以发挥不同的作用：①促进细胞外基质合成［5］;②促进血管的形成［6］;③促进细胞凋亡［7］;④刺激成纤维细胞生长［8］。
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