医药学论文：研究局部应用GDNF对运动神经的保护作用

1 材料和方法
1.2 实验标本制备 术后4、8、12周分别处死动物并取材。经左心室插管灌注多聚甲醛固定液后，取腰膨大脊髓(中心为L4～6节段)，－20℃连续冰冻切片，进行尼氏体染色(Thionine硫堇染色法)观察。
1.4 图像分析及数据处理 切片经光镜检查照相及显微图像分析系统分析，计数脊髓前角大、中型运动神经元数目，对髓鞘进行定量测量。检测数据以(±s)表示，采用SPSS软件分析，不同时间点两样本均数比较进行t检验，组内不同时间点比较用SNKq检验。
2.1 坐骨神经功能指数(sciatic function inders，SFI)测定 4周时，两组大鼠的坐骨神经功能指数无统计学差异，8、12周时，GDNF组SFI优于NS组，P＜0.05(见表1)。
2.3 透射电镜观察结果 12周时，GDNF组：可见轴突及髓鞘成熟，髓鞘呈同心圆样排列，胞膜清楚，板层结构清晰，雪旺细胞增生活跃，胞浆内富含线粒体，髓鞘分布较均匀，形态及大小趋于正常。NS组：可见有髓纤维髓鞘薄，厚薄不均匀，髓鞘板层松散，密度不均，排列不规则，轴突直径较细，髓鞘受压变形。
3 讨 论
3.2 GDNF 自1993年首先发现GDNF以来，大量的动物实验表明，GDNF对发育和成熟的运动神经元有神经营养作用，是迄今为止发现的对运动神经元作用最强的神经营养因子。本实验中，实验组应用GDNF后，不同时间点分别与对照组比较，发现运动神经元的数量以及外周神经髓鞘的厚度及直径等指标均优于对照组。提示精细的神经断端缝合加神经元保护较单纯神经断端缝合更有利于神经功能恢复。采用Allen脊髓损伤模型研究表明，脊髓挫伤后GDNFmRNA表达急剧增加，损伤局部给予外源性GDNF能避免和减少脊髓神经元凋亡［5，6］。