医药学论文:对独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究
摘要:通过观察独一味胶囊对小鼠镇痛作用与血清、脑组织中NO含量的影响,以及对小鼠出血时间和血浆复钙时间的影响,得出结论:独一味胶囊能显著提高小鼠痛阈值,降低小鼠血清及脑组织中NO水平,明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间,表明独一味胶囊具有良好的镇痛、止血作用。
关键词:独一味胶囊 镇痛 止血 一氧化氮(NO)
1 材料
1.2试剂及仪器 独一味胶囊(DYW,甘肃独一味药业提供,批号:07111214);独一味胶囊高剂量为925.71mg/kg,中剂量为462.86mg/kg,低剂量为231.43mg/kg;阿司匹林(ASPL,陕西汉王药业有限公司,批号:070416);L-精氨酸(L-Arg)(北京化学试剂公司,批号:070112);L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)(美国Sigma公司)。紫外可见分光光度计(日本岛津),柠檬酸钠溶液、生理盐水、氯化钙溶液等。
2.1对小鼠镇痛作用及血清和脑组织NO含量的影响
2.1.1.1浸尾法(45℃)检测痛阈 昆明种小鼠50只,随机分为5组:DYW组(462.86mg/kg)、DYW(462.86 mg/kg)+L-Arg(200mg/kg)、DYW(462.86mg/kg)+L-NAME(37.5mg/kg)、ASPL组(200mg/kg)、对照组(生理盐水)。将小鼠尾尖部3cm处用苦味酸做一标记,并将这一部位浸入45℃热水中,以鼠尾缩出水面为痛反应指标,以鼠尾浸入水中至缩出水面的时间为痛阈。首先测定基础痛阈(间隔10 min测定2次痛阈,以2次均数为基础痛阈)。然后各组依次分别:DYW灌胃(ig)、DYW灌胃(ig)+L-Arg腹腔注射(ip)、DYW灌胃(ig)+L-NAME腹腔注射(ip)、ASPL灌胃(ig)、生理盐水灌胃(ig)。药后30分钟、60分钟分别按药前方法测定药后痛阈。实验结束后,摘小鼠眼球取血,3500r/min离心15分钟,取血清。取血后快速处死小鼠取脑称质量,加入适量生理盐水低温(冰水浴中)制成脑组织匀浆。血清和脑组织匀浆均置于-20℃冰箱保存待测。
2.2对小鼠出血时间及血浆复钙时间的影响
2.2.2对血浆复钙时间的影响 取22~25g小鼠45只,雌雄各半,实验分组同上,禁食禁水24小时。摘眼球取血1ml,放入加有0.1ml柠檬酸钠溶(38mg/ml)的离心管内,混匀后以1000r/min离心10分钟,取内径8mm试管1支,加入混合血浆和生理盐水各80μl,随即放入37℃水浴中温浴2分钟,然后加入80μl氯化钙溶(2.8mg/ml),混匀后再放入37℃水浴中,立即计时,记录自加钙后至纤维蛋白形成、液面不动所需时间,即为生理盐水组血浆复钙时间。将生理盐水换成独一味胶囊药物高、中、低剂量,按相同方法和条件测出各组的血浆复钙时间。
3 结果
3.1.1对小鼠痛阈的影响 结果显示:DYW组在提高小鼠痛阈值方面优于生理盐水组;L-Arg能显著减弱DYW的镇痛作用。
3.2对小鼠出血时间及血浆复钙时间的影响 实验表明,药物组同对照组比较:独一味胶囊高、中剂量组在缩短出血时间及血浆复钙时间方面,明显优于对照组;剂量组之间比较,高剂量组效果优于低剂量组,呈现明显的量效关系。
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