医药学论文：探析新生儿肺炎克雷伯菌的耐药性

摘要： 目的 分析我院新生儿科病区产ESBLs、AmpC酶的肺炎克雷伯菌的耐药情况,指导临床合理用药。方法 按CLSI 推荐的超广谱β内酰胺酶( ESBLs)确证试验,对肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测,并用三维试验法、三维试验抑制试验进行AmpC酶检测。结果 160株肺炎克雷伯菌中,检到产ESBLs肺炎克雷伯菌84株,阳性率高达52.50%。71株耐头孢西丁菌株检到23株产AmpC酶,其中单产AmpC酶5株,产Ampc+ESBLs菌株18株。AmpC酶阳性率为14.38%(23/160)。结论 分离自我院新生儿科的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药严重,主要以产ESBLs和(或)AmpC酶为主。给临床抗感染治疗带来很大困难,是院内感染的一大隐患。

1 材料与方法
1.1.1 菌株来源 肺炎克雷伯菌160株均分离自2008年1月至2008年12月我院新生儿病区患儿呼吸道标本。
1.1.3 试剂 克拉维酸(中国药品生物制品检定所);邻氯西林(上海四药有限公司)。
1.2 方法
1.2.2 超广谱β-内酰胺酶( ESBLs) 检测 按CLSI推荐的确证试验测定ESBLs。
1.2.4 β-内酰胺酶粗提取物的制备 取50μl0.5麦氏单位菌液加入12ml胰蛋白胨肉汤中,35℃恒温摇床孵育6h,4000r/min,4℃离心20min,弃上清,将沉淀物-70℃反复冻融5次,加入pH 7.0的0.01mol/L磷酸盐缓冲液1.2ml混匀,14000r/min,4℃离心20min,取上清液即为酶粗提物,无菌试验后-20℃保存。
1.2.6 三维试验抑制试验 在涂有E.coli ATCC25922 菌液的M-H平皿中央贴1片30μg头孢曲松纸片,垂直挖四个狭缝,分别加入40μl的试验菌株酶粗提取物、36μl酶粗提取物+4μl 2mmol/L邻氯西林、36μl酶粗提取物+4μl 2mmol/L克拉维酸、36μl酶粗提取物+4μl 2mmol/L克拉维酸+4μl 2mmol/L邻氯